本发明公开了两步法制备羟基磷灰石-丝素蛋白复合支架材料的方法，包括以下步骤：(1)在碱性溶液环境下，丝素蛋白分子上羧基与溶液中的Ca²⁺离子形成化学键合；滴加PO₄^3-离子时，Ca²⁺离子又与PO₄^3-离子反应生成羟基磷灰石，从而制备了羟基磷灰石-丝素蛋白的复合泥浆；(2)在羟基磷灰石-丝素蛋白复合泥浆中加入丝素蛋白溶液后，复合物中的丝素蛋白分子与溶液中丝素蛋白分子形成分子间氢键结合，注入模具并经冷冻-冷冻干燥后制备了多孔的羟基磷灰石-丝素蛋白复合支架材料。本发明制备的支架材料与现有共混法直接制备的羟基磷灰石-丝素蛋白复合支架材料相比，具有良好的力学性能。